研究紹介

私たちは、人々の健康に役立てることを目標として、ミトコンドリアの A) エネルギー産生と活性酸素種の発生、B) 細胞死、の2つの側面を制御したいと考え、研究を行っています。



【背景と目的】

１） ミトコンドリアは両刃の剣

　20億年以上前に、好気性細菌であるαプロテオバクテリア（ミトコンドリアの祖先）が細胞内で働くようになりました。その結果、細胞は酸素を利用して多くのエネルギーを作れるようになり、生物は大きく進化を遂げました。このことから、ミトコンドリアは進化の原動力になったと考えられています。一方で、良いことばかりではなく、反応性の高い酸素を細胞内で利用するという危険性も、細胞は同時に取り込みました。
　この両刃の剣ともいえるミトコンドリアの性質は、我々ヒトをはじめとするミトコンドリアを持つあらゆる生物の中で、現在も受け継がれています。ミトコンドリアで発生した活性酸素によるダメージは、急激に表れるものだけではなく、徐々に蓄積されて影響を及ぼすものもあります。かつて我々の祖先が体験した短命かつ栄養不足の時代は、ミトコンドリアの長所が強調され、短所が目立たなかったと考えられます。しかし、栄養を豊富に摂取することができ、また、長寿社会の現代においては、その負の面の影響が無視できなくなってきています。実際に、ミトコンドリアによる酸素の危険性に起因する、あるいは危険性と関連する疾病は、神経変性疾患を含め非常に多岐に渡ります。私たちは、栄養が豊富な高齢化の時代にふさわしいミトコンドリアの制御方法を見出し、現在や未来の人々の役に立てたいと考え、日々研究をしています。



２） 細胞死シグナルを中継するミトコンドリア

　私たちの細胞には、細胞内のタンパク質が協調して働いて細胞を死に至らしめる、プログラム細胞死という仕組みがあります。例えば、アポトーシスというプログラム細胞死は、がんになる細胞を殺して、がん細胞が増殖するのを未然に防いでいます。一方、アポトーシスが過敏に生じると死ぬ必要のない細胞が死ぬことになり、例えば、早く老化の症状を示したりします。この例のように、細胞死の適切な制御は生物にとって極めて大切です。
　ミトコンドリアは、プログラム細胞死のうち、アポトーシスとパータナトスにおいて、細胞死のシグナルが細胞内を伝わる際に中継地点として働きます。私たちは、細胞死の際にミトコンドリアが働く仕組みを調べて、細胞死を制御する方法を見出したいと考えています。



３） 細胞内でわかること、取り出してわかること。

　ミトコンドリアの働きを調べる方法には、細胞内部で挙動を調べる方法と細胞の外に取り出してメカニズムを調べる方法の2つがあり、正確な理解には両方の方法が必要です。細胞内部で調べるのは、細胞内でどのようなふるまいを示すか理解するためです。一方、細胞外で調べるのは、ミトコンドリア周囲の環境を厳密に調節して、細胞内で認められた挙動がどのようなメカニズムで起こるのか調べるためです。これらを図にすると、以下のようになります。私たちは、両方の方法の開発を行っています。


細胞内小器官の計測



４） 1個のミトコンドリアだからこそ、わかること

　細胞外に取り出されたミトコンドリアを対象とした今までの研究（メカニズムの研究）では、緩衝液に懸濁された非常に多く（数百万～数億）のミトコンドリアから発信される信号の総和を見ていました。これでは、個々のミトコンドリアの変化が平均されてしまい、たとえば、増えたり減ったりを繰り返すような変動を見ることができません。そのため、正確な挙動を見落としており、本来のメカニズムに迫れていない可能性が十分にあります。そこで、私たちは、ミトコンドリアをカバーガラスに吸着させて、顕微鏡を用いて、1個1個の挙動が観察できるようにしています。


個々の挙動の計測



【研究テーマと主な成果】

１） 細胞内小器官を計測・操作する技術の開発

　ミトコンドリアを意図したとおりに操作するために、ミトコンドリアを操作する技術と、操作により起こる変化を検出する技術の両方を開発しています。以下に、具体例を紹介します。

A） ミトコンドリアを傷つけずに取り出す技術　（Shibata et al., 2015）

細胞内と同じ大きさと活性をもつミトコンドリアを、無傷のまま取り出すことに世界で初めて成功しました。この技術は、ミトコンドリアが働く仕組みや、タンパク質や薬がミトコンドリアに作用する仕組みを調べるのに役立つと期待されます。細胞外に取り出したミトコンドリアは、働く仕組みを調べるのに適した試料です（背景３参照)。しかし、従来は細胞をすりつぶしてミトコンドリアを取り出していたため、細胞内で細長いミトコンドリアはちぎれ、働きも低下していました。そこで、私たちは細胞膜だけを穏やかに壊して、ミトコンドリアをそっと取り出す技術を開発し、成功しました。



B） ミトコンドリアの膨潤を検出する技術の開発　（Morikawa et al.,2014）

ミトコンドリアが膨らむのを、1個のミトコンドリアで検出することに成功しました。この技術は、細胞死の進行のメカニズムや、その促進・抑制を行う薬の発見に役立つことが期待されます。ミトコンドリアは、内膜と外膜の2つの膜から出来ています。内膜は折り畳まっているのに対し、外膜は1枚の膜です。そのため、内膜の折り畳みが解けると、内膜は大きく膨らみ、外膜は破けます。この時に、ミトコンドリアの外膜と内膜の間にある細胞死を誘導する因子が細胞質に放出され、細胞死が進行すると考えられています。





２） ミトコンドリアが働く仕組みに関する研究

ミトコンドリアを意図したとおりに制御するためには、ミトコンドリアの何をどのように制御するべきか、知る必要があります。そのため、私たちはミトコンドリアの働く仕組みを調べています。

A） ミトコンドリアの内部密度と活性の同時計測　（Haseda et al., 2015）

1個のミトコンドリアの屈折率を計測する技術を開発し、ミトコンドリアの内部密度が高くなると、ミトコンドリアが分極することを発見しました。この発見は、細胞内で生じているミトコンドリアの伸縮が、活性調節機構である可能性を示唆しています。



B） ミトコンドリアが一時的に脱分極する仕組み　（Hattori et al., 2005）

1個のミトコンドリアで膜電位変動を定量的に計測し、ミトコンドリアを電気的に短絡（ショート）させる機構を発見しました。この発見は、ミトコンドリアによる活性酸素発生の抑制につながることが、期待されます。





３） ミトコンドリアが細胞に及ぼす影響の研究

A） CypDと細胞死　MPT検出　（Tazawa et al., 2009）

（準備中）

B） ストレスホルモンがATP合成に及ぼす影響　（Fujita et al., 2009）

（準備中）